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[发明专利]C₄植物叶肉细胞、维管束鞘细胞的类囊体膜的分离提取方法-CN201910179907.1在审
发明人：林雪乔;刘明媚;李秀秀;秦晓春 -专利权人：济南大学
申请日： 2019-03-11 - 公布日： 2019-05-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，本发明提供了设计出了一种C₄植物的叶肉细胞与维管束鞘细胞的类囊体膜的分离提取方法，通过破壁机的不同档位的机械作用，分别得到叶肉细胞及维管束鞘细胞的类囊体膜，采用本工艺提取类囊体膜，提取时间短，且与酶解法相比，本发明的工艺简单，提取时间短，且处理量大，最后通过本发明可以分别得到叶肉细胞的类囊体膜及维管束鞘细胞的类囊体膜，从而获得需要的蛋白等。
类囊体膜维管束鞘细胞叶肉细胞分离提取生物技术领域工艺提取机械作用处理量酶解法破壁机档位蛋白

[发明专利]一种植物叶片胞内水分有效性的检测方法-CN202010708122.1有效
发明人：邢德科;李振义;吴沿友;陈晓乐;陈璐;赵玉国 -专利权人：江苏大学
申请日： 2020-07-22 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： G01N33/00 文献下载
摘要：首先对待测植物叶片进行饱水和干燥处理，测定各失水时刻叶片的相对含水量、叶片厚度和叶肉细胞厚度，计算各失水时刻叶片的相对含水量、叶片厚度和叶肉细胞厚度占前一相邻失水时刻各值的百分比，进一步获取各相邻失水时刻间叶片的相对含水量、叶片厚度和叶肉细胞厚度的相对变化量，由此判断植物叶片胞内的水分有效性。
一种植物叶片水分有效性检测方法

[发明专利]一种阳春砂叶肉原生质体分离纯化的方法-CN201811353315.9有效
发明人：何国振;杨锐培;苏晓欣;李明晓;何卓航 -专利权人：广州中医药大学（广州中医药研究院）
申请日： 2018-11-14 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种阳春砂叶肉原生质体分离纯化的方法，包括材料的制备与预处理，采用酶解法进行原生质体的分离，采用沉降法与漂流法结合法纯化原生质体等步骤。本发明通过研究影响原生质体产量和活力的因素，如材料是否经过预处理、酶种类及浓度、酶解时间、渗透压调节剂浓度、不同纯化方法对叶肉细胞原生质体纯化效果的影响，优化了阳春砂叶肉原生质体分离纯化的实验条件，以获得高产和高活力的阳春砂原生质体，为阳春砂通过体细胞融合培育新品种奠定了基础。
一种阳春叶肉原生质体分离纯化方法

[发明专利]一种用于单细胞转录组测序的亚洲棉根尖细胞与叶肉细胞原生质体的解离方法-CN202110181753.7有效
发明人：刘乾坤;李鹏涛;韦洋洋;程爽;刘玉玲;卢全伟;周忠丽;蔡小彦;王玉红;刘方;彭仁海 -专利权人：安阳工学院;中国农业科学院棉花研究所
申请日： 2021-02-09 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于单细胞转录组测序的亚洲棉根尖细胞与叶肉细胞原生质体的解离方法，该方法包括亚洲棉种子的萌发、组织培养、酶解解离原生质体、离心收集原生质体以及显微观察鉴定等步骤。本发明从亚洲棉的根尖和叶片所解离的原生质体浓度较高(高于3000cells/μL)，且活率不低于92％，完全符合10×Genomics单细胞转录组测序的上机要求。因此本发明得出的根尖与叶片解离原生质体的方法，更好的解决了亚洲棉根尖细胞与叶肉细胞原生质体解离困难以及活率低的难题，从而可以更好的研究棉花抗逆过程特定基因的表达，对于棉花的遗传发育与培育抗逆棉花的品种至关重要
一种用于单细胞转录组测序亚洲根尖细胞叶肉原生质体解离方法

[发明专利]新的核酸序列及其在获得植物病原体抗性的方法中的用途-CN200710073151.X无效
发明人： M·弗兰克;R－M·史密特 -专利权人：巴斯福植物科学有限公司
申请日： 2005-05-06 - 公布日： 2007-08-08 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了用于增强植物或植物器官、组织或细胞对穿透叶肉细胞的病原体的抗性的方法。所述方法的特征在于所述植物或植物器官、组织或细胞中的愈伤葡聚糖合成酶活性与对照植物相比降低。
核酸序列及其获得植物病原体抗性方法中的用途

[发明专利]新的核酸序列及其在获得植物病原体抗性的方法中的用途-CN200580023596.6无效
发明人： M·弗兰克;R－M·史密特 -专利权人：巴斯福植物科学有限公司
申请日： 2005-05-06 - 公布日： 2007-08-01 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了用于增强植物或植物器官、组织或细胞对穿透叶肉细胞的病原体的抗性的方法。所述方法的特征在于所述植物或植物器官、组织或细胞中的愈伤葡聚糖合成酶活性与对照植物相比降低。
核酸序列及其获得植物病原体抗性方法中的用途

[发明专利]一种用于获取植物叶肉细胞染色质构象信息的方法及试剂盒-CN202310396946.3有效
发明人：王晓武;张路澎;赵冉泽;武剑;梁建丽;蔡旭;张磊 -专利权人：中国农业科学院蔬菜花卉研究所
申请日： 2023-04-14 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开一种用于获取植物叶肉细胞染色质构象信息的方法及试剂盒，该方法包括取植物叶肉细胞在交联缓冲液中进行处理，然后经研磨、过滤得到细胞核；将细胞核经通透处理后加入酶切反应液，得到平末端DNA序列，进一步进行加尾反应本发明的方法简化了细胞核的提取步骤，并且只需要一轮消化和连接就可以完成主要实验。
一种用于获取植物叶肉细胞染色质构象信息方法试剂盒

[发明专利]一种杜梨原生质体的制备方法-CN201710360788.0有效
发明人：唐君;常有宏;蔺经;李晓刚 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2017-05-19 - 公布日： 2017-07-21 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物学及生物技术领域，公开了一种杜梨原生质体的制备方法。本发明通过杜梨材料的前处理和质壁分离处理，利用纤维素酶、离析酶和果胶酶组合酶解杜梨叶肉组织，有效实现了杜梨原生质体的制备，克服了杜梨原生质体难以分离的问题，有效建立了杜梨叶肉原生质体的制备方法。本发明为突破杜梨遗传转化瓶颈，建立杜梨细胞工程技术体系，为杜梨原生质体遗传转化、基因瞬时表达检测、原生质体融合等提供了技术依据。
一种杜梨原生质体制备方法

[发明专利]一种提高植物产量的方法及其表达盒-CN200710179540.0无效
发明人：储成才;司丽珍;张亚芳;童红宁;王义琴;潘学彪;姚海根;默罕默德;左建儒;宋德林 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2007-12-14 - 公布日： 2009-06-17 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：所述提高植物产量的方法，是将可在植物叶肉细胞中特异性表达焦磷酸水解酶的表达盒导入植物中，筛选得到可表达焦磷酸水解酶的植物，即为产量提高的植物。所述可在植物叶肉细胞特异性表达焦磷酸水解酶的表达盒，包括依次串联的cyFBPase启动子、焦磷酸水解酶基因和OCS终止子。本发明方法可大大提高转基因植物，特别是转基因农作物的产量水平。
一种提高植物产量方法及其表达

[发明专利]甘蓝型油菜菘油细胞质雄性不育系的选育方法-CN201510639085.2在审
发明人：李再云;康雷;杜雪竹 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2015-09-29 - 公布日： 2016-01-13 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明属于油菜分子育种技术领域，具体涉及一种甘蓝型油菜菘油细胞质雄性不育系的选育方法。还涉及原生质体融合技术重组甘蓝型油菜-菘蓝的胞质和核基因组，创建重组胞质的细胞质雄性不育系。育种过程包括通过分离和提取甘蓝型油菜-菘蓝的叶肉原生质体，通过细胞融合方法获得甘蓝型油菜-菘蓝的原生质体融合的体细胞杂种；以所得的甘蓝型油菜-菘蓝的体细胞杂种菘蓝-甘蓝型油菜叶肉原生质体细胞杂种为母本，以甘蓝型油菜为父本进行多代回交，获得因雄蕊心皮化的细胞质雄性不育系；经过线粒体基因PCR扩增证实融合过程中线粒体基因组发生重组，导致核质不协调而表现出不育。
甘蓝油菜细胞质雄性不育选育方法

[发明专利]一种以叶肉原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法-CN201610954179.3在审
发明人：施季森;霍爱玲;夏兵;陈金慧;陈桢雨;杨立明 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2016-11-03 - 公布日： 2017-03-08 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种以叶肉原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法，包括杂交鹅掌楸叶肉原生质体的制备、质粒的准备、转化和观察。本发明以杂交鹅掌楸叶肉细胞的原生质体做为遗传转化的受体系统，通过PEG介导的方法，以绿色荧光蛋白GFP基因作为报告基因，通过荧光显微镜检测到GFP基因高效的瞬间表达。
一种叶肉原生质体受体杂交鹅掌高效瞬间基因表达方法

[发明专利]马蔺叶肉原生质体及其制备方法-CN201811566917.2在审
发明人：唐君;常有宏;李建斌;于利;王神云;余方伟 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-12-20 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种马蔺叶肉原生质体及其制备方法，通过马蔺材料的前处理和质壁分离处理，利用纤维素酶、离析酶和果胶酶组合酶解马蔺叶肉组织，有效实现了马蔺原生质体的制备，克服了马蔺原生质体难以游离的技术瓶颈，有效建立了一种马蔺叶肉原生质体的高效制备方法本发明为实现马蔺快速遗传转化，基因瞬时表达研究等提供了一种有效的操作品台，为建立马蔺细胞工程技术体系进行马蔺原生质体培养、原生质体融合、原生体遗传转化、基因瞬时表达研究等提供了技术支撑。
马蔺叶肉原生质体制备瞬时表达遗传转化原生质体细胞工程技术原生质体培养原生质体融合高效制备技术瓶颈技术支撑纤维素酶叶肉组织有效建立有效实现质壁分离组合酶解果胶酶离析酶前处理原生体基因游离研究作品

[发明专利]一种分析C4植物光合耐旱能力的方法-CN201910215459.6有效
发明人：刘文娟;雷绍荣;郭灵安;宋君;张富丽;常丽娟;王东;尹全 -专利权人：四川省农业科学院分析测试中心
申请日： 2019-03-21 - 公布日： 2019-11-29 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明的一种分析C4植物光合耐旱能力的方法，通过将暗适应后的C4植物叶片，切片观察叶肉和维管束鞘细胞的叶绿素荧光并测定荧光参数；或/和将NBT和DAB染色完成的C4植物叶片，切片观察叶肉和维管束鞘细胞的本发明以细胞为单位分析，对于研究C4植物光合机构对逆境的响应具有应用意义。
耐旱能力维管束鞘细胞叶绿素荧光分析切片叶肉叶片完整叶片应用意义荧光参数组织化学暗适应活性氧染色观察组化逆境细胞响应研究

[发明专利]一种祛疤组合物和敷料-CN201610616713.X在审
发明人：陈海佳;葛啸虎;王一飞;麦锦连;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-07-28 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： A61K38/18 文献下载
摘要：本发明提供一种祛疤组合物和敷料，包括：间充质干细胞提取物、成纤维细胞生长因子和芦荟提取物；所述成纤维细胞生长因子的质量浓度为10～50ng/mL，所述芦荟提取物的质量分数为0.1～1％；所述间充质干细胞培养液为P1～P5代的间充质干细胞依次经过混合培养基和无酚红培养基培养后得到；所述的混合培养基包括DMEM/F12培养基和胎牛血清。所述芦荟提取物按照以下方法制得：将库拉索芦荟鲜叶的表皮与叶肉分离，然后从叶肉中榨取凝胶汁，对凝胶汁依次进行除菌、浓缩和冻干，得到芦荟提取物。本发明采用间充质干细胞培养液，免疫原性低，对人体无害，配合成纤维细胞生长因子和芦荟提取物，能够淡化疤痕，修复皮肤创面。
一种组合敷料

[发明专利]一种祛疤组合物和敷料-CN201610615521.7在审
发明人：陈海佳;葛啸虎;王一飞;麦锦连;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-07-28 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： A61K38/18 文献下载
摘要：本发明提供一种祛疤组合物，包括：成纤维细胞培养液、成纤维细胞生长因子和芦荟提取物；所述成纤维细胞生长因子的质量浓度为10～50ng/mL，所述芦荟提取物的质量分数为0.1～1％；所述成纤维细胞培养液为P1～P5代的成纤维细胞依次经过混合培养基和无酚红培养基培养后得到；所述混合培养基包括DMEM培养基和胎牛血清；所述芦荟提取物按照以下方法制得：将库拉索芦荟鲜叶的表皮与叶肉分离，然后从叶肉中榨取凝胶汁，对凝胶汁依次进行除菌本发明采用成纤维细胞培养液，安全有效，与成纤维细胞生长因子和芦荟提取物配合，能够促进皮肤修复，减少炎症和瘢痕组织的形成。本发明还提供一种敷料。
一种组合敷料

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